祭遵,字弟孙,东汉初颍川颍阳人,今临颍东北一带人。祭遵少好经书,其家虽富,但祭遵十分节俭,常穿破旧衣服,其母去世,他亲自背土,垒造坟茔。曾有豪吏欺负他,被他结交的侠士杀死,城中人开始认为他怯懦,此事之后,人们都畏惧他。
刘秀发动义兵讨伐王莽时,祭遵数次进见刘秀。刘秀看他风度不凡,仪容伟岸,便任命他为门下史。后来,他随军进攻河北,担任军市令,他执法严明,军市秩序良好,没有欺诈现象。一次,有个伺候刘秀的小郎犯了法,祭遵毫不客气,当场处死了他。刘秀得知,十分恼怒,下令收捕祭遵要加以惩处,主薄陈副劝阻说:“明公常想让众军整肃,现在祭遵执法毫不避忌袒护,正是让您的教令行诸于军的好机会。”刘秀这才赦免了祭遵,并任命他为刺奸将军。事后,刘秀对将领们说:“你们要避开祭遵!我府邸奴仆犯法尚且严惩,他也一定不会偏袒你们的。”不久,祭遵又升任偏将军,随从刘秀平定河北,因功受封为列侯。
建武二年(26年)春,光武帝刘秀任命祭遵为征虏将军,封为颍阳侯。及至进军箕关攻打南方敌兵时,敌人的弩箭射到祭遵的嘴上,伤口血流不止。众将见祭遵受伤,渐生退意,阵脚移动。祭遵情急之中,不顾伤痛,横刀立马,厉声喝斥:“谁敢后退!”士兵见祭遵如此刚强,勇气百倍,终于大破敌兵。祭遵又断绝了张满粮道,攻破城邑。第二年祭遵跟随谏议大将军朱祐到东阳,大破延岑。
之后,祭遵到涿郡讨伐张丰,至渔阳斩杀彭宠,大军所到之处如急风骤雨,所向披靡。收复土地后,祭遵屯驻留乡,教化百姓,训练士兵,树立朝廷威信。
建武八年,光武帝亲自率军征讨隗嚣。汉军想求一战胜敌,诸军合力攻敌,但所带粮草不够,士兵逃亡很多。隗嚣趁势反攻,各路汉军都向东溃逃,安定、北地、天水、陇西一带又被隗嚣占据,只有祭遵留在驻地,独守冲难,没有退却。第二年春,祭遵病死军中。
祭遵爱儒术,不仅选拔人才独尊儒术,就连饮酒时的娱乐,也只用儒家的雅歌投壶。他还建议朝廷为孔子立后,并奏请设置五经大夫。他虽然身在军旅,但从不忘俎豆之礼。
祭遵一生为人廉约小心,克己奉公。他得到赏赐,都分给部下士卒,不治产业,家无余财。自己一生,穿皮裤,盖布被。夫人衣裳不曾加饰边,简朴至极。临死时,他还诫家人将自己用牛车拉回,薄葬洛阳,不事奢华。
祭遵死后,光武帝刘秀悲痛异常。他的灵柩运回河南时,刘秀命百官都去迎接,自己也素服亲临,经过他的丧车时,刘秀泪流满面,不能自己。葬礼那天,刘秀又亲自用太牢祭祀他,并为他送葬。葬礼完毕,刘秀又到他的坟前吊唁,并到家中慰恤其家属。每当朝会时,光武帝常常叹息,说:“安得忧国奉公之臣如祭征虏者乎!”赠谥号“成侯”。